Ina jukumu muhimu katika michakato ya maisha, phosphorylating Tyrr, Ser, Thr, iko kwenye peptidi.Asidi ya amino ya fosforasi hutumiwa kwa kawaida katika utengenezaji wa peptidi ya asidi ya fosforasi, ambayo kwa sasa inatumika katika asidi ya amino ya phenyl fosforasi.Asidi za amino za HBTU/phosphorylated hutumiwa kwa kawaida kuunganisha njia ya HOBt/DIEA ya asidi ya fosforasi ya amino, lakini peptidi ya asidi ya fosforasi inachagua kasoro za mbinu hii, haswa katika peptidi za peptidi au fosfati ya amino zinazozalishwa kwa muda mrefu, kuunganisha ufanisi ni mdogo, chini. usafi wa bidhaa ya mwisho.Kwa phosphopeptidi hii, tulizingatia mbinu ya kuchagua baada ya phosphorylation.Mchakato wa uzalishaji ni uondoaji wa kuchagua wa vikundi vya kinga vya mnyororo wa upande wa amino asidi ambayo yanahitaji kuwekewa lebo baada ya usanisi wa peptidi.Kwa Tyr, Thr inaweza kuguswa moja kwa moja kwa kutumia amino asidi na minyororo ya upande ambayo haijalindwa.-Ser (trt), imeondolewa kwa kiasi katika mazingira ya 1% TFA /DCM.
Phosphorylation, na fosforasi benzini mara mbili na nitrojeni nne ni yanayotokana na phosphoramide tetrazolium intermediates hai, kushikamana na hidroksi, basi chini ya malezi ya asidi oxidation fosforasi fosforasi, majibu kamili.
Kwa sasa, njia ya urekebishaji ya fosforasi ya peptidi kuna aina mbili kuu:
(1) moja kwa moja kuanzishwa kwa kiasi uhakika fosforasi amino katika mlolongo polipeptidi;
(2) baada ya resini kuzalishwa kwenye mfuatano wa peptidi, hadi Ser, Tyr, au Thr phosphorylation ya hidroksili ya mnyororo wa upande.
1) itahakikisha wastani wa asidi ya amino yenye fosforasi itaanzisha moja kwa moja mlolongo wa peptidi:
Hiyo ni, asidi ya amino ambayo inahitaji kuwa na phosphorylated itakuwa phosphorylated na kulindwa ipasavyo mapema kwa kutumia (Thr,Ser au Tyr), na kisha fosforasi itapunguzwa hadi mahali pa uteuzi wa faharisi ya polipeptidi kulingana na mchakato wa kawaida wa uzalishaji wa SPPS. .Njia hii ni rahisi kufanya kazi, imekuwa njia kuu ya urekebishaji wa fosforasi ya biashara ya peptidi.
2) baada ya resini kuzalishwa kwenye mlolongo wa peptidi, hadi Ser hydroxy phosphorylation, Tyr, au minyororo ya upande wa Thr:
Mapambo ya fosforasi kwa kutumia fosforasi ya mnyweo mmoja kwenye njia ya polipeptidi, kwa sababu ya kizuizi kikali kinachotokana na vikundi vikubwa katika mapambo ya mnyororo wa kando, ni ngumu kwa fosforasi ya asidi ya amino kusinyaa na mnyororo wa peptidi.Katika siku zijazo, kuanzishwa kwa asidi ya amino itakuwa ngumu zaidi, haswa katika mapambo yaliyo na tovuti nyingi za phosphorylation, kizazi kitakuwa kigumu sana, muundo wa mwisho wa bidhaa ni ngumu, ngumu kutenganisha, na mavuno ni ya chini sana.
Kwa hivyo, wakati tovuti nyingi kwenye mnyororo wa peptidi zina phosphorylated, mtu anaweza kuchagua kutoa mlolongo wa peptidi kwenye resini na kisha kuilatiti kwa kikundi cha mnyororo wa upande wa haidroksili ya Ser, Tyr, au Thr: kizazi chake kinahusisha uondoaji wa kuchagua wa Kikundi cha kinga cha mnyororo wa upande ambacho kinahitaji utambuzi wa asidi ya amino baada ya usanisi wa peptidi.Kwa Tyr, Thr inaweza kutumia moja kwa moja minyororo ya upande ya amino asidi haijalindwa katika majibu.
Msingi wa ulinzi wa mnyororo wa kando 1% mazingira ya TFA/DCM yanaweza kuondolewa kwa kiasi.Njia hii inapochaguliwa, phosphoramidite tetrazolium amilifu kati inaweza kuzalishwa kwa kutumia dibenzyl phosphoramidite na tetrazolium, iliyounganishwa na kundi la haidroksili, na kisha kuoksidishwa kuunda kundi la fosforasi katika mazingira ya peroxyasidi ili kukamilisha majibu.
Muda wa kutuma: Sep-08-2023