Katika utafiti wa kibiolojia, polypeptides yenye mlolongo mrefu hutumiwa kawaida.Kwa peptidi zilizo na zaidi ya asidi 60 za amino katika mfuatano, usemi wa jeni na SDS-PAGE kwa ujumla hutumiwa kuzipata.Hata hivyo, njia hii inachukua muda mrefu na athari ya mwisho ya kutenganisha bidhaa si nzuri.
Changamoto na suluhisho za usanisi wa peptidi ndefu
Katika usanisi wa peptidi ndefu, sisi daima tunakabiliwa na tatizo, yaani, kizuizi kikali cha mmenyuko wa condensation huongezeka na ongezeko la mlolongo katika awali, na wakati wa majibu unahitaji kurekebishwa ili kufanya majibu kamili.Hata hivyo, muda mrefu wa majibu, madhara zaidi yanatolewa, na sehemu ya peptidi inayolengwa huundwa.Mabaki hayo - minyororo ya peptidi yenye upungufu ni uchafu muhimu unaozalishwa katika usanisi wa peptidi ndefu.Kwa hiyo, katika usanisi wa peptidi ndefu, tatizo muhimu ambalo ni lazima tushinde ni kuchunguza hali ya hali ya juu ya mmenyuko na mbinu za mmenyuko, ili kufanya mmenyuko wa ufupisho wa asidi ya amino kuwa wa kina zaidi na kamili.Kwa kuongeza, punguza muda wa majibu, kwa sababu muda mrefu wa majibu, athari zisizoweza kudhibitiwa zaidi, ni ngumu zaidi ya bidhaa.Kwa hivyo, mambo matatu yafuatayo yamefupishwa:
Mchanganyiko wa microwave inaweza kutumika: Kwa baadhi ya asidi ya amino iliyokutana katika mchakato wa awali ambayo si rahisi kuunganishwa, awali ya microwave inaweza kutumika.Njia hii ina matokeo ya ajabu, na inapunguza sana muda wa majibu, na inapunguza uundaji wa bidhaa mbili muhimu.
Njia ya usanisi wa vipande inaweza kutumika: Wakati baadhi ya peptidi ni vigumu kuunganishwa kwa mbinu za usanisi za kawaida na si rahisi kusafishwa, tunaweza kupitisha ufupishaji mzima wa asidi kadhaa za amino katika sehemu fulani ya peptidi hadi mnyororo wa peptidi kwa ujumla.Njia hii inaweza pia kutatua matatizo mengi katika awali.
Mchanganyiko wa Acylhydrazide unaweza kutumika: Asilihydrazide usanisi wa peptidi ni njia ya awali ya awamu ya mango ya N-terminal Cys peptidi na C-terminal polipeptidi hidrazidi kemikali mmenyuko kuchagua kati ya malezi ya vifungo amide kufikia peptidi bonding mbinu.Kulingana na nafasi ya Cys katika mnyororo wa peptidi, njia hii inagawanya mnyororo mzima wa peptidi katika mifuatano mingi na kuziunganisha kwa mtiririko huo.Hatimaye, peptidi inayolengwa hupatikana kupitia mmenyuko wa awamu ya kioevu ya condensation.Njia hii sio tu inapunguza sana wakati wa awali wa peptidi ndefu, lakini pia huongeza kwa kiasi kikubwa usafi wa bidhaa ya mwisho.
Utakaso wa peptidi ndefu
Umaalumu wa peptidi ndefu bila shaka husababisha vipengele changamano vya peptidi ghafi.Kwa hivyo, pia ni changamoto kusafisha peptidi ndefu na HPLC.amiloidi mfululizo wa mchakato wa utakaso wa polipeptidi, kunyonya uzoefu mwingi na kutumika kwa mafanikio katika utakaso wa peptidi ndefu.Kwa kupitisha vifaa vipya, kuchanganya mifumo mingi ya utakaso, kujitenga mara kwa mara na mbinu zingine za uzoefu, kiwango cha mafanikio cha utakaso wa peptidi mrefu kiliboreshwa sana.
Muda wa kutuma: Apr-18-2023